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    淋巴细胞的分离

    材料与试剂1.淋巴细胞分层液有两种:(1)聚蔗糖—泛影葡胺液:聚蔗糖(polysucrose solution),商品名Ficoll,分子量400 000,多配制成40±1%(W/V)水溶液,也有干粉出售。应用时,用蒸馏水配制9%溶液。泛影葡胺溶液(Meglumini diatrizoici),商品名Vrografin,结构式为3,5—二乙酰氨基2,4,6三碘苯甲酸1—去氧—甲氨基山梨醇。含量为60%或75%,每安瓶为20ml装,常用于人的脏器造影。应用时,取60%泛影葡胺原液20ml,加双蒸馏水15.38ml,即为33.9%泛影葡胺。1.077±0.001聚蔗糖—泛影葡胺的配制:9%聚蔗糖液 24份33.9%泛影葡胺液 10份混合即可。必要时,可测比重。需要备用,可用G5漏斗过滤除菌或114.3℃高压灭菌15min,4℃保存。一般可保存3个月。(2)泛影葡胺—右旋糖酐(dextran)液34%泛影葡胺液 10份60%右旋糖酐液 12.5份混合,即为比重1.07~1.09的分层液。分装于棕色瓶中,4℃冰箱保存备用。2. 3%的明胶液 称取明胶3g,溶于0.9%的灭菌生理盐水,终体积100ml,114.3℃高压灭菌10min,冷却后4℃冰箱保存,临用时37℃预热10min。3.
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