免疫酶组化法(猪瘟组化法)

材料与试剂1．α－萘酚液α一苯酚 1.00g40%乙醇 100.00ml3%H2O2 0.20ml混合即可,现用现配。2．派洛宁液派洛宁(Pyroming) 0.10g苯胺(Aniline) 4.00g40%乙醇 96.00ml3．内源性酶抑制剂：0.01%H2O2的0.01%的叠氮钠溶液。1%H2 O2 1.00ml1%Na N3 1.00ml0.015mol/L pH 7.4 PBS液 100.00ml4．0.05Mol/L pH 7.6 Tris－HCl缓冲液A液：0.2mol/L Tris液三羟甲基氨基甲烷 2.43gH2 O 100.00mlB液：0.1mol/L HCl取A液25ml，B液38.9ml，混合，加蒸馏水至100ml即可。5．DAB液(Karnovsky液)0.05Mol/L pH 7.6 Tris－HCl缓冲液 100.00ml 3，3－二胺基联苯胺盐酸盐 76mg1% H2 O2 0.5ml配后立即使用。6．0.10Mol/L pH7.4 PBS液。操作方法1．猪瘟酶标抗体工作滴度的确定对组化法来说，最简单的确定工作滴度的方法是将酶标抗体进行一系列的倍比稀释，然后对已知阳性标本片进行染色，以最为清晰的阳性结果的最大稀释倍数或稍提高1～2滴度作为工作滴度。购买商品猪瘟酶标抗体,则按其说明的工作浓度稀释即可。2．待检标本片的
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