火箭电泳

原理抗原在含有抗体的凝胶中进行电泳，在电场作用下，抗原向一个方向移动，在移动的过程中，逐步与凝胶中的抗体结合而沉淀呈火箭状。沉淀峰面积越大，说明抗原量越多，二者呈正相关，因此可用于抗原的定量测定。此法具有敏感性高、快速等优点。材料与试剂1．0.05mol/L pH8.6巴比妥缓冲液配成2％的琼脂。2．抗原与抗体3．其它材料同免疫电泳。操作方法1．将2％琼脂煮沸溶化后，放入60℃水浴箱中。2．将适量的抗体用0.05mol/L pH8.6巴比妥缓冲液稀释至琼脂同样的体积量，放入60℃水浴。3．将两者充分混合，立即倒成平板。4．琼脂板冷却后在一侧打孔，孔径3mm，孔距6mm。5．于孔内分别加入不同浓度的定量抗原。6．电泳孔端接负板。电流强度3mA/cm（或电压10V/cm），电泳时间2h~10h。7．停止电泳，将琼脂板于生理盐水中浸泡24h，中间换液数次。8．染色、脱色、干燥同免疫电泳。9．抗体最适量的测定将已知抗原与抗体以不同浓度梯度进行方阵试验，找出所形成的火箭状沉淀线，轮廓清晰，前端尖窄而闭合的抗体最小量作为抗体的最适用量。10．标准曲线的绘制以抗体的最适用量制成琼脂板，分别用已知的不同浓度抗原（同一浓度的也必须做一批，以求平均值）进行电泳，泳毕后染色，测其沉淀峰的高度（或面积），然后以抗原量为纵轴，沉淀峰高度（或面积）为横轴，制成标准曲线。11．对照组的设置在测未
< 1 > < 2 >

设为首页 | 加入收藏 | 广告服务 | 友情链接 | 版权申明