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原理圆盘电泳即聚丙烯酰胺凝胶电泳。它是利用丙烯酰胺和双丙烯酰胺在催化剂的作用下聚合成大分子的凝胶物。它同时兼有分子筛和电泳效应。当样品通过凝胶进行电泳时,便可以根据其样品中各分子的电荷和分子量的不同而泳动出不同的区带。由于聚丙烯酰胺凝胶化学性质较琼脂稳定,很少带有侧基,在电泳过程中,吸附作用与电渗作用均小,所以该技术的分辨率均高于其它琼脂电泳技术。材料与试剂1.20%单体母液丙烯酰胺(Aorylamide) 19.60g双丙烯酰胺(N,N—methylene Bisaerylamide) 0.40gH2O 加至 100.00ml2.pH8.0 Tris—EDTA缓冲液Tris(三羟基甲基氨基甲烷) 6.05gEDTA(乙二胺四乙酸) 1.17gH2O 加至 100.00ml3.B—三甲基胺基丙腈液(B—DMPN)(Dimethylaminopropionitrile),原液于4℃冰箱保存。4.10%过硫酸铵溶液过硫酸铵 0.50gH2O 加至 5.00ml现用现配或配后低温保存不超过一周。5.0.025Mol/L pH9.0 硼酸缓冲液硼酸 3.948g硼砂 30.512gH2O 加至 1000.0ml使用时取该液90ml加H2O至1 440ml,即为电泳液。操作方法1.凝胶管的制备 取20%单体母液3.60ml,Tris-E < 1 > < 2 >
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