免疫电泳

原理免疫电泳是琼脂平板电泳和双相免疫扩散两种方法的结合。将抗原样品在琼脂平板上先进行电泳，使其中的各种成分因电泳迁移率的不同而彼此分开，然后加入抗体做双相免疫扩散，把已分离的各抗原成分与抗体在琼脂中扩散而相遇，在二者比例适当的地方，形成肉眼可见的沉淀弧。该方法可以用来研究：①抗原和抗体的相对应性；②测定样品的各成分以及它们的电泳迁移率；③根据蛋白质的电泳迁移率，免疫特性及其它特性，可以确定该复合物中含有某种蛋白质；④鉴定抗原或抗体的纯度。试剂与器材同琼脂平板电泳。操作方法1．在玻璃板的中央放置一小玻棒（d=2mm~3mm），然后用0.05mol/L pH8.6巴比妥缓冲液配制1％琼脂，制成琼脂板，板厚2mm.。2．在玻棒的两侧，板中央或1／3处，距玻棒4mm～8mm各打直径3mm～6mm的孔。3．在孔内加满血清。4．将玻璃板置电泳槽上进行电泳。电流为2mA/cm～3mA/cm（或电压3V/cm～6V/cm），电泳时间4h～6h。5．停止电泳，用小刀片在玻璃板两侧切开，取出玻璃棒，加抗血清样品。6．于湿盒内37℃（或常温）扩散24h，取出观察。7．于生理盐水中浸泡24h，中间换液数次，取出后，加0.05％氨基黑染色5min～10min，然后以1mol/L冰醋酸脱色至背景无色为止。8．制膜、观察、保存标本。免疫电泳结果分析1．常见的沉淀弧由于经电泳已分离的各抗原成分在琼脂中呈
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