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    免疫电泳

    呈放射状扩散,而相应的抗体呈直线扩散,因此生成的沉淀一般多呈弧形,常见的弧形如下:①交叉弧:表示两个抗原成分的迁移率相近,但抗原性不同;②平行弧:表示两个不同的抗原成分,它们的迁移率相同,但扩散率不同;③加宽弧:一般是由于抗原过量所致;④分枝弧:一般是由于抗体过量;⑤沉淀线中间逐渐加宽并接近抗体槽,一般由于抗原过量,在白蛋白位置处形成;⑥其它还有弯曲弧、平坦弧、半弧等。2.沉淀弧的曲度 匀质性的物质具有明确的迁移率,能生成曲度较大的沉淀弧。反之有较宽迁移范围的物质,其沉淀弧曲度较小。3.沉淀的清晰度 沉淀线的清晰度与抗原抗体的特异性程度有关,也与抗体的来源有关。抗血清多来源于兔、羊、马。兔抗体的特点是形成沉淀线宽而淡,抗体过量对沉淀线影响较小,而抗原过量,沉淀线发生部分溶解。马抗血清所形成的沉淀线致密、清晰,抗原或抗体过量时,复合物沉淀溶解、消失,而且产生继发性的非特异性沉淀。因此使用抗原抗体时,一定要找好适当的比例。4.沉淀弧的位置 高分子量的物质扩散慢,所形成的沉淀线离抗原孔较近;而分子量较小的物质,扩散速度快,沉淀弧离抗体槽近一些。抗原浓度高沉淀弧偏近抗体槽,反之,抗体浓度过高,沉淀弧偏近抗原孔。注意事项1.免疫电泳分析法的成功与否,主要取决于抗血清的质量。抗血清中必须含有足够的抗体,才能同被检样品中所有抗原物质生成沉淀反应。2.抗血清虽然含有对所有抗原物质的相应抗体,但抗体效价有高有低,因此要适当考虑抗原孔径的大小和抗体槽的距离。3.免疫电泳要求分析的物质一方为抗原,另一方为沉淀反应性抗体。因此没有抗原性的物质或抗原性差的物质、非沉淀反应性抗体,均不能用免疫电泳进行分析。
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