相关文章  
  • 直接凝集反应(Direct agglutination reaction)
  • 反向间接乳胶凝集反应
  • 鸡新城疫和鸡传染性法氏囊炎二联高免卵黄抗体的制备
  • 间接炭凝反应
  • 猪瘟、猪丹毒、猪肺疫三联血清的制备
  • 免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation):蛋白质的浓缩
  • 琼脂免疫扩散试验
  • 沉淀反应(Precipitation reaction)
  • 试管凝集反应
  • 玻片凝集反应
  •   推荐  
      科普之友首页   专利     科普      动物      植物    天文   考古   前沿科技
     您现在的位置在:  首页>>动物 >>生命科学

    免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation):Fab片段的制备

    利用胃蛋白酶分解IgG,将抗体断链为Fab和Fc片段。具体操作方法如下:1.将IgG粉末100mg,溶于2ml0.10Mol/L pH4.0醋酸缓冲液。溶液稍成白浊,30℃,保温10min。2.取结晶胃蛋白酶1.50mg,溶于1.50ml 0.10Mol/L pH4.0醋酸缓冲液,加入上述溶液中,于30℃作用16h。3.用0.10Mol/L pH8.0 PBS透析一夜。4.加入硫醇使成0.10mol/L,在室温下搅拌30min。5.加入1Mol/L的碘乙酰胺(Indoacetamide)使成为0.10Mol/L,室温下搅拌1h。6.用0.01Mol/L PBS 1 000ml透析过夜,3 000r/min,离心30min,去沉淀。7.以上清过SephadexG100(40cm×2.0cm)以0.10Mol/L PBS洗脱。8.以每管6ml收集,约在第8管开始,Fab片段被洗脱。9.测OD280nm,将Fab管合并,浓缩、冻干。10.如制备F(ab)2,上述4~6步骤则可以省略。
        你还没注册?或者没有登录?

        如果你还没注册,请赶紧点此注册吧!

        如果你已经注册但还没登录,请赶紧点此登录吧!
         

          设为首页       |       加入收藏       |       广告服务       |       友情链接       |       版权申明      

    Copyriht 2007 - 2008 ©  科普之友 All right reserved