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    免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation):IgE的分离与提

    (一)材料与试剂1.血清2.饱和硫酸铵溶液3.洗脱液0.005Mol/L pH7.4PB液0.025 Mol/L pH7.4PB液0.01Mol/L pH7.4PBS液(0.14mol/L NaCl)4.DE525.SephadexG150(二)操作方法1.取血清倍比稀释后,加等量饱和(NH4)2SO4溶液,盐析。2.离心取沉淀,溶于少量生理盐水中,透析、除盐。3.过DE52柱,以0.005Mol/L pH7.4PB液洗脱,收集洗脱蛋白峰(IgG),弃去。4.换以0.025Mol/L pH7.4 PB液洗脱,洗下的蛋白峰主要是IgE。5.透析除盐。6.过G150柱,以0.01Mol/L pH7.4PBS(0.14Mol/L NaCl)洗脱,收集洗脱液即为纯化的IgE。7. 浓缩、鉴定。
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