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    免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation):连续提取免疫

    混合即可。⑻ 0.01 Mol/L pH8.0PBS液取0.10Mol/L pH8.0 PB液 100mlNaCl 8.20gH2O 加至 1 000ml3.DEAE-纤维素(细粒级)4.SephadexG200(二)操作方法1.取一定量的血清,加等量的生理盐水,然后逐渐滴加饱和硫酸铵溶液,使成40%的饱和度,静置30min。2.10 000r/min离心10min,去上清。3.加入一定量的生理盐水,使沉淀溶解,再加入饱和硫酸铵溶液,使成40%饱和度。10 000r/min离心10min,去上清。4.再重复步骤3一次。5.将沉淀以少量生理盐水溶解,透析,除盐浓缩。6.制备DEAE-纤维素柱,以0.005Mol/L pH8.0PB液平衡。同时制备SephadexG200凝胶柱,以0.01Mol/L pH8.0PBS液平衡并进行洗脱。7.以0.005Mol/L pH8.0PB液洗脱,得蛋白液为IgG。7. 以0.025 Mol/L pH8.0PB液洗脱,得蛋白主要是IgE,再过SephadexG200凝胶柱,收集第一峰即为纯IgE。8. 以0.035 Mol/L pH8.0PB液洗脱,得蛋白主要是IgA,再过SephadexG200凝胶柱,收集第一峰即为纯IgA。10.以0.10Mol/L pH5.8PB液洗脱,洗脱液主要有IgM、IgG及白蛋白的混杂物。11.以0.40Mol/L pH5.2PB液洗脱,得蛋白液主要是IgM。过SephadexG200,收集第二峰即为纯IgM。
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