免疫组化常用方法

二步法：EnVision SystemEnVision显色系统是将二抗和酶通过一个多聚葡聚糖骨架联接成一个多聚体（即EnVision）直接放大信号40-50倍，把传统的二抗、三抗分别孵育合为一次孵育。特点：敏感、省时、方便、背景低（避免了内源性生物素干扰）。EnVision工作程序：1）脱蜡、水化组织切片。2）预处理组织切片（据一抗具体说明而定）3）蒸馏水漂洗，置于TBS中。4）阻断内源性过氧化物酶（仅用于EnVisionTM/HRP）5）蒸馏水漂洗，置于TBS，10分钟6）一抗孵育10-30分钟7） TBS漂洗10分钟8） EnVisionTM孵育10-30分钟9） TBS漂洗10分钟10) 色源底物溶液孵育10分钟11) 蒸馏水漂洗12) 复染及封片免疫染色方法The basic principles of ICC• 抗原抗体反应• 标记化学反应• 呈色化学反应要求待检标本形态结构和抗原性保存良好,抗原不从原位扩散或丢失Specimen preparation取材新鲜，固定及时，形态保存完好，抗原物质的抗原性不丢失、不扩散和被破坏• Fixation• Sample TypeCryostat (frozen) sectionsParaffin SectionsAntigen Retrieval Techniq
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