Ⅰ、反应体系A、 抗体1、 第一抗体：常用的或自备的抗体a、 如果第一抗体或自备的抗体能够进行荧光标记（如FITC，PE或其他），请参考直接染色步骤b、 如果第一抗体不能进行荧光标记，则参考间接染色步骤2、 第二抗体：经荧光标记过的多克隆抗体B、 缓冲体系：PBS(Ca2 and Mg2 free,e.g.,Cat.#9240,Irvine Scientific,Santa Ana,CA)＋2%新鲜小牛血清（或者0.2%BSA）＋0.1%叠氮钠C、 HAB（e.g.,Cat.#50009,Irvine Scientific,CA），其他途径购买的经热失活的HAB或经56℃失活1小时的HAB。将其分装成小包装并于-20℃贮藏。Ⅱ、步骤1、 将要检测的样品按常规的方法制成单细胞悬浮液。在最后的步骤中，用1ml预冷的缓冲液至少洗一次，再用预冷的缓冲液将细胞悬浮至浓度为1×107cells/ml（从而50μl=5×105cells）检测细胞活力是否达到90%。如果细胞活力低于90%，必须通过Ficoll-Hypaque分离法去除死细胞，否则死细胞会非特异地结合到抗体上的。更适宜的方法是将死细胞通过流式细胞仪分析加以区分，以去除死细胞（具体请参考在通过流式细胞仪捕获前在最后的重新悬浮细胞时加入propidium iodide或7-氨基-放线菌素D的方法）
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