标记抗原的放射免疫技术（ＲIA）

（一）原理当抗原遇到相应的抗体便形成抗原抗体复合物（Ag＋Ab ↔Ag －Ab），当用放射性同位素标记抗原再与相应的抗体结合便形成标记抗原和抗体复合物。即： Ag Ab↔ Ag－Ab。当标记抗原和未标记抗原一起加入相应的抗体时则两种抗原产生相互的竞争，而生成有标记抗原和抗体复合物以及非标记抗原和抗体复合物。生成标记抗原抗体复合物与非标记抗原的含量在一定的限度内是呈反比的，所以利用这个原理去测定未知抗原或抗体。﹡Ag Ag Ab Ag（F）＋Ab Ag Ag Ab（B） Ag如果Ag多则*Ag－Ab（即结合抗原B）生成量减少，*Ag（即游离抗原F）的剩余量就多。相反，Ag少，则*Ag－Ab生成量就多，*Ag的剩余量就少。通过检测游离抗原F和结合抗原B，就可知未知抗原的存在与否以及含量的多少。（二）放射免疫抗原的制备1、完全抗原为了保证免疫反应的特异性，对放射免疫抗原要求的纯度较高，必须在90%以上。通常采用电泳、凝胶过滤、离子交换层析等技术获得较高纯度的抗原。纯化的抗原必须经过纯度鉴定才能使用。鉴定办法：通过电泳只出现一条沉淀线，或者以圆盘电泳进行纯度分析。2、半抗原要获得较好的免疫原性，必须将半抗原与蛋白质大分子的载体结合起来形成一个完全抗原。结合的载体，通常包括血清白蛋白、球蛋白、纤维蛋白、甲状腺球蛋白、鸡卵蛋白等。连接方式则因半抗原的功能基团与
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