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体孔为长方形0.2cm×1.1cm。抗原、抗体各加5μl及50μl。抗原用上述酶标抗原做1︰20至1︰30稀释。4．电泳 抗原孔置于负极，电压4 V/cm ~5V/cm，电泳时间45min~60min，电泳后，于蒸馏水中荡洗1min~2min即可，用滤纸吸去水分，并用毛细吸管吸尽长孔及圆孔中的水液后，即可用底物的溶液显色。5．配制底物溶液，现用现配。将饱和联苯胺溶液，加等量pH7.6硼酸缓冲液，然后将上液9份和0.1％过氧化氢1份相混，即为所需的底物溶液。6．免疫酶染色 将琼脂凝胶板置于培养皿中，缓缓倾入底物溶液，直至浸没凝胶板为止，置于室温或37℃，经1h~2h用目测可观察反应结果。（四）结果判定1．阳性反应：在抗原抗体孔之间呈现明显的棕红色的线条。2．阴性反应：不出现棕红色线条者。
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