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    分泌型IgA的分离与鉴定

    (一)材料与试剂1.初乳2.SephadexG2003.0.10Mol/L pH6.8PB液4.0.01Mol/L pH7.4PB液5.DEAE52(二)操作方法1.取初乳20ml,10 000rpm离心10min,弃去表面脂肪层及底部的沉淀物。2.取乳清过SephadexG200柱(柱规格为2.50cm×90cm),以0.10Mol/L pH6.8PB液洗脱,第一峰为IgA(含IgG)。3. 收集乳液,于0.01Mol/L pH7.4PB液中透析。4. 将透析液浓缩至5mg/ml以上。5. 过DE52层析柱,用0.01Mol/L pH7.4PB液洗脱,洗下蛋白峰为IgG,弃去。6. 换用0.10Mol/L pH6.8PB液或0.01Mol/L pH7.4PBS(0.10Mol/L NaCl)液洗脱,收集洗脱液 ,即为较纯的IgA液。7. 必要时,可再过一次SephadexG200柱。8. 浓缩,鉴定 
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