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    IgG的分离与提纯

    (一)材料与试剂配制 1.动物血清2.硫酸铵饱和溶液硫酸铵 800g~850gH2O 1 000ml加热至绝大部分溶质溶解为止,趁热过滤,置室温过夜,然后以28%NH4OH调pH至7.0(不调pH值也可以)。注:硫酸铵以质量优者为佳,因次品中含有少量重金属对蛋白质巯基有影响。如次品必须除去重金属,可在溶液中通入H2S,静置过夜后滤过,加热蒸发H2S即可。3.0.01Mol/L pH7.4PB液A液:0.10Mol/L NaH2PO4液NaH2PO4·2H2O 15.60g加H2O至 1 000.mlB液:0.10Mol/L Na2HPO4液Na2HPO4·12H2O 35.80g加H2O至 1 000ml取A液19ml,B液81ml加水至1 000ml即可。4.1%BaCl2溶液5.纳氏液HgI 115.00gKI 80.00g加H2O至 500.00ml溶化后过滤,然后再加20%NaOH500.00ml,混合即可。6.0.50 Mol/L的HCl液和0.50 Mol/L的NaOH液。7.洗脱液:0.03Mol/L的NaCl液。8.透析袋(或玻璃纸)。(二)操作方法1.取20ml血清,加生理盐水20ml,再逐滴加入(NH4)2SO4饱和溶液10ml,使成20%(NH4)2SO4溶液,边加边搅拌,充分混合后,静置30min。2.3 000r/min
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