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    免疫组化非特异性背景染色及其控制方法

    尤其高,镜下可以识别,不要将其当成阳性结果。避免方法:① 石蜡切片 0.3%双氧水-甲醇溶液处理切片;② 冰冻切片 3%双氧水处理切片5分钟(99:1)因为未经固定包埋,大部分酶未被破坏;③ 对于骨髓涂片最好用非过氧化物酶标记的抗体如碱性磷酸酶(AP)↓磷酸萘酯 水→α-萘酚 偶氮染料↓快兰(fast blue)或快红(fast red)↓ ↓ 兰色 红色用明胶甘油封片,不能用含二甲苯的封片剂,溶于二甲苯。6. 内源性生物素以 24mg/ml的卵白素封片15分钟;7. 交叉反应PcAb敏感性高,但特异性稍低,容易出现非特异性染色。避免方法:①尽可能稀释抗体;②尽可能用McAb;三、 抗体最大稀释度的求法最大稀释度的目的:1.节约、2.特异性染色↑、非特异性染色↓(决定其最大稀释度)棋盘法如 稀释度1:50 1;100 1:150 1;200特异性染色 非特异性染色 - -
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