放射免疫分析法

一、放射免疫分析的基本试剂　　（一）标准品　　标准品是放射免疫分析法定量的依据，由于以标准品的量用来表示被涮物质的量，故标准品与被测物质应当化学结构一致并具有相同免疫活性。标准品作为定量的基准。应要求高度纯化。标准品除含量应具有准确性外，还应具备稳定性，即在合理的贮存条件下保持原来的特性。　　按实验要求，将标准品用缓冲液配成含不同剂量的标准溶液，用于制作标准曲线。　　（二）标记物　　标记抗原应具备：①比放射性高，以保证方法的灵敏度；②免疫活性好；③所用的核素的半衰期尽可能长，标记一次可较长时间使用，这对来之不易的抗原尤其重要；④标记简便、易防护。要准确测量B与F的放射性，必须有足够的放射性强度。所选用的标记抗原的量，在使用125I时达5000～15000cpm。　　（三）抗体　　应选择特异性高、亲和力强及滴度好的抗体，用于放射免疫测定。　　根据稀释曲线，选择适当的稀释度，一般以结合率为50%作为抗血清的稀释度。　　（四）B与F分离剂　　以2%加膜活性炭溶液为例，2%加膜活性炭溶液的配制：　　活性炭2g（杭州木材厂生产，森工牌732型）右旋糖酐T200.2g加0.1mol/L PB 至100ml电磁搅拌1h，然后置于变通冰箱冰箱待用。　　（五）缓冲液　　放射免疫分析技术所用的缓冲液有多种，要通过实验选用抗体和抗原结合最高的缓冲液。目前最常用的缓冲液有下列几种：①磷酸盐缓冲液
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