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小时或4℃过夜。6．PBS洗涤3×3分钟。7．滴加二抗，室温30分钟。8．PBS洗涤3×3分钟。9．加PAP复合物，室温60分钟。10． PBS洗涤3×3分钟。11． 0.04％DAB＋0.03％ H2O2显色5～10分钟。12． 充分水洗。13． 苏木精复染，封片观察。 4） 双PAP法1～10同单PAP法。11． 二次加酶标二抗。12． PBS洗。13． 二次加PAP。14． PBS洗。15． 0.04％DAB＋0.03 ％H2O2显色5～10分钟。16． 苏木精复染核，封片，镜检。 5） ABC法（卵白素－生物素－过氧化物酶复合物法）1～8同PAP法9）加ABC液，室温60分钟。10） PBS洗。11） 0.04％DAB＋0.03％ H2O2显色5～10分钟。12） 充分水洗。13） 苏木精复染核，封片，镜检。
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