蛋白质印迹免疫分析（Western Blot Anglysis）

【基本原理】蛋白质印迹免疫分析的过程包括蛋白质经凝胶电泳分离后，在电场作用下将凝胶上的蛋白质条带转移到硝酸纤维素膜上，经封闭后再用抗待检蛋白质的抗体作为探针与之结合，经洗涤后，再将滤膜与二级试剂—放射性标记的或辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶偶联抗免疫球蛋白抗体结合，进一步洗涤后，通过放射自显影或原位酶反应来确定抗原—抗体—抗抗体复合物在滤膜上的位置和丰度。【器材】 1．转移电泳仪 2．硝酸纤维素膜 3．滤纸 4．剪刀 5．手套 6．小尺【试剂】 1．Ig G 标准品 2．羊抗人辣根过氧化物酶（HRP）标记的Ig G 抗体 3．转移buffer：Tris 3.03g，Gly 14.4g，甲醇200ml，加三蒸水至1000ml充分溶解，4℃冰箱贮存。 4．Tris buffer（TBS）：Tris 2.42g，NaCl 29.2g，溶于600ml三蒸水，再用1N HCl调至pH7.5，然后补加三蒸水至1000ml。 5．漂洗液（TTBS）：TBS液500ml，加Tween20 250ul。 6．封闭液：5%脱脂奶粉。 7．抗体buffer：1.5g BSA溶于50ml TTBS。 8．显色液DAB（3
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