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    病原性球菌的检测

    非致病葡萄球菌的最重要指标。致病性葡萄球能产生血浆凝固酶,此酶的作用类似凝血酶原,在血浆中激活剂的作用下,可使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性的纤维蛋白,从而导致血浆凝固(呈现块状或颗粒状)。非致病性葡萄球菌不产生此酶,因而不能凝固血浆。此酶有两种存在形式:结合于细胞壁上血浆凝固酶,采用玻片法测;游离形式的血浆凝固酶,采用试管法检测。 【材料】 1. 金-、白色葡萄球菌琼脂斜面18~24小时培养物。 2. 1:2人或兔血浆。 3. 生理盐水、玻片、接种环等。 【方法】 1. 取载玻片一张,用蜡笔分成三等份。 2. 于第一、二格内滴加入血浆各1滴,于第三格内滴加生理盐水1滴。 3. 取金-葡萄球菌斜面培养物少许,分别混悬于第三格及第一格内,取白色葡萄菌混悬于第二格内,分别研磨混匀。静置2~3分钟。 【结果】 第三格和第二格中细菌呈出均匀混浊,而第一格中细菌呈现块装或颗粒状凝固现象,即判定为血浆凝固酶阳性。 三、抗链球菌溶血素“O”试验 【原理】 链球菌“O”溶血素是A族溶血性链球菌的代谢产物之一,能溶解人或兔的红细胞,对氧敏感,如与空气中的氧接触;能使蛋白质上的-SH基氧化成-S-S基,失去溶血活性。在实验中可借还原剂的作用,使它重新恢复溶血活力。 溶血素“O”具有很强的抗原性,人感染该菌后,2~3周产生相应的抗体,此种抗体能中和溶血素“O”的溶血活力。因此,测定患者血清中抗链球菌溶血素“O”抗体的效价,可作为风湿热等疾病的辅助诊断。抗“O”试验的效价是指完全不溶血之血清最高稀释度。 【材料】 1. 患者血清:1:50稀释 2. 溶血素“O”及还原剂片剂(按说明配制) 3. 1%兔红细胞 4. 生理盐水,试管、吸管,37℃水浴箱等。 【方法】 1. 取清洁小试管5支,依次排列编号。 2. 于第一管注入生理盐水1.8ml,第二管0.1ml,第三管0.2ml,第四管0.3ml,第五管0.5ml。 3. 于第一管注入0.2ml 1:50稀释的患者的血清,反复吹吸三次,混匀。吸出0.4注入第二管,吸出0.3ml注入第三管,吸出0.2ml注入第四管,吸出0.6ml弃去,第五管不加,作为对照管,此时,各管的血清稀释度为1:500、1:625、1:833、1:1250。 4. 于每管注入还原溶血素“O”0.25ml,置37℃水浴15分钟。 5. 取出后于每管注入1%红细胞悬液0.25ml,置37℃水浴45分钟,观察结果。 抗“O”试验操作表  共2页: 上一页 1 [2] 下一页
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