紫外分光光度法常见问题（仪器的校正和检定、对溶剂的要求、测定

1.仪器的校正和检定由于温度变化对机械部分的影响，仪器的波长经常会略有变动，因此除应定期对所用的仪器进行全面校正检定外，还应于测定前校正测定波长。常用汞灯中的较强谱线237.83、 253.65、 275.28、296.73、313.16、334.15、365.02、404.66、435.83、546.07与576.96nm；或用仪器中氘灯的486.02与656.10nm谱线进行校正；钬玻璃在279.4、287.5、333.7、360.9、418.5、460.0、484.5、536.2与637.5nm波长处有尖锐吸收峰,也可作波长校正用,但因来源不同会有微小的差别，使用时应注意。吸收度的准确度可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml，按下表规定的波长处测定并计算其吸收系数。规定的吸收系数如下表，相对偏差可在±1％以内。　　─────────┬─────┬─────┬─────┬────── 　　波　　长　　(nm)　│ 235(最小)│ 257(最大)│ 313(最小)│　350(最大) 　　─────────┼─────┼─────┼─────┼────── 　　吸收系数E1％　1cm │　124.5 　│　14
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