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国外的同学说一般他们克隆都是直接购买感受态细胞转化,实验效率很高的。我总是以为如果是一般的克隆实验,自己做感受态好像够用了--如果是建库,购买现成的感受态细胞就是非常必要的首选,因为转化效率确实比实际手工制备的高2-3个数量级以上,特别是建库,能实实在在地提高实验的效率。实际上,除了建库以外,Stratagene为更好的表达蛋白、以及转化效率较低的巨无霸质粒,而特别优化了一些感受态细胞,做表达的人其实可以参考一下,有点用处的。在这里借用Merck公司提供的资料供大家参考。 Stratagene的XL10-Gold®几乎算得上是高效转化的代名词了,研究者一旦要克隆大质粒、连接DNA和建库,克隆甲基化DNA,进行蓝白斑筛选等,首选的就是XL10-Gold®和其衍生菌。XL10-Gold®用途包括:--克隆大DNA:包括表达质粒,基因组DNA克隆--构建质粒文库:减少DNA大小偏倚性,使全长cDNA克隆、双杂交质粒等各种大小的质粒转化效率更接近,提高文库代表性(比DH10B高25倍)。Hte 基因型 Hte(高效转化)基因型是Stratagene开发的特异性提高大质粒、连接DNA的宿主菌基因型,并使细胞生长加快(当天获得菌落),已经成功应用于25kb超螺旋DNA和8kb连接DNA的克 < 1 > < 2 >
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