|
|
|
|
|
|
|
克隆。XL10-Gold®,BL21-Gold,BL21-CodonPlus®,SoloPack® Gold 和96Pack® Gold等系列细胞都带有这个新的性状。超级感受态细胞 Stratagene提供多种>5 x 109 转化子/μg 超螺旋DNA转化效率的化学法超级感受态细胞正是克隆获得大质粒、连接DNA克隆和建库时最值得推荐的。电转化感受态细胞 Stratagene的电转化感受态细胞特别耐受电击处理,方便好用,在DNA材料极珍贵、量少时,或构建有代表性文库时,建议采用电转化感受态细胞。ElectroTen-Blue®细胞是目前商品化的电转化感受态细胞中效率最高的,达到>3 x 1010 转化子/μg 超螺旋DNA。此外XL1-Blue,XL1-Blue MRF’,SURE®,ABLE® 和TG1等细 胞也提供电转化形式感受态细胞。SURE®-克隆不稳定DNA 大肠杆菌DNA修复系统会针对重复序列、二级结构(如Z-DNA)等真核DNA进行重排或删除修饰。SURE感受态细胞针对uvrC,umuC,SbcC和RecJ等参与修饰的大肠杆菌基因或蛋白进行突变,提高了真核来源、不规则DNA的稳定性达20倍以上,并且适合克隆甲基化DNA。提供化学和电转化感受态细胞,效率分别达1x1010 和1x109。ABLE®-克隆毒性DNA 目的DNA的蛋白产物常常对细胞产生毒性,通常的解决办法是采用低拷贝质粒,或者采用极为严紧的表达调控。为了获得稳定的克隆,ABLE细胞减少ColE来源质粒的拷贝数(如pUC、pBluescript系列载体),以达到保持相对较高拷贝数的同时使本底表达对于细胞的毒性降至最低的效果。MR系列®-克隆甲基化DNA 真核基因组DNA常常因高度甲基化而被大肠杆菌修饰系统切割、删除,在构建文库时,由于要对cDNA进行甲基化保护,某些cDNA克隆也较难完成。采用Stratagene的MR (Minus Restriction)突变删除了修饰系统的感受态细胞,可以构建质量非常高的cDNA和基因组文库。这些细胞包括:用于大质粒克隆的XL10-Gold®超级感受态细胞,克隆连接DNA、转化效率 目前最高的ElectroTen-Blue®电转化感受态细胞,单次反应包装的SoloPack® Gold,以及XL2-Blue MRF´ ,XL1-Blue MRF´ Kan(四环素抗性质粒),XL1-Blue MR(没有F´附加体),克隆有二级结构的SURE细胞等。重点推荐 Stratagene的ElectroTen-Blue(转化效率>3×1010)和Novagen的Nova XG Zappers(转化效率>1×1010)电转化感受态细胞均具有endA-基因型,保证质粒优质高产;recA-重组缺陷基因型适合甲基化DNA克隆,确保片段不被删除或重排;能以IPTG诱导进行蓝白斑筛选(lacZΔM15),也使这两种细胞非常好用。此外,ElectroTen-Blue还可被M13单链噬菌体感染(F’)。 < 1 > < 2 >
|
|
|
|
设为首页 | 加入收藏 | 广告服务 | 友情链接 | 版权申明
Copyriht 2007 - 2008 © 科普之友 All right reserved |