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PBS 重悬细胞,800rpm离心5min,洗去未结合一抗,重复一次。(5)加入荧光标记(FITC)标记的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm离心5min,去上清,PBS洗涤两次。(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重悬细胞;固定待测。(7)流式细胞仪检测荧光值,每管计数10 000个细胞。C.细胞周期、细胞凋亡及DNA倍体分析样品(PI染色)的制备:(1)待测样本制成单细胞悬液,然后200g离心5分钟,弃上清。(2)用4℃预冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小时。(3)调整细胞浓度为106细胞/毫升,取1毫升细胞悬液,用PBS洗三次,细胞重悬于1毫升PI染液中,37℃孵育30分钟即可进行流式分析。(4)PI染液终浓度为50微克/毫升,RNase A终浓度为20微克/毫升。 你还没注册?或者没有登录?
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