Beyozol,总RNA抽提试剂

Beyozol,总RNA抽提试剂产品编号产品名称包装价格 R0011 Beyozol，总RNA抽提试剂 100ml 388.00元点击看放大图产品简介： Ø 碧云天生产的Beyozol-总RNA抽提试剂是目前世界上最先进的总RNA抽提试剂之一。本产品采用和Trizol完全相似的原理和方法，可以采用和Trizol完全相同的方法进行操作，但价格有Trizol的30%！ Ø Beyozol对动植物细胞或组织及细菌的总RNA抽提均适用。 Ø Beyozol抽提所得RNA无DNA和蛋白污染。一般所得RNA溶于DEPC水后的A260/280值为1.6-1.8。 Ø 每一百万细胞用Beyozol抽提可得5-15微克RNA；每毫克组织用Beyozol抽提可得1-10微克RNA。产量因细胞和组织不同而异。 Ø 抽提两个样品约需一小时。 Ø Beyozol抽提所得RNA可直接用于Northern，点杂交，纯化mRNA，体外翻译，RNase protection assay， cDNA克隆，以及RT- PCR。 Ø 每100ml Beyozol可以抽提100个六孔板中的样品或100个50-80mg的组织样品。包装清单：产品编号产品名称包装 R0011 Beyozol 100ml — 说明书 1份保存条件： 4℃保存，本试剂自订购之日起一年内有效。注意事项： Ø 需自备氯仿，异丙醇，DEPC，75%乙醇(DEPC水配制)，和DEPC水。DEPC，DEPC水可向碧云天订购。 Ø 所有离心管，枪头及相关溶液都必需无RNA酶污染。耐高温器物可150烘烤4小时以除去RNA酶，其它器物除RNA酶可考虑用0.01% 的DEPC水浸泡过夜，然后灭菌，烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(体积比)diethylpyrocarbonateDEPC至重蒸水或MiliQ 级水中，处理过夜，灭菌即成DEPC水。 Ø 必需戴一次性手套操作，且尽量不要对着RNA样品呼气或说话，以防RNA酶污染。 Ø Beyozol含有毒物质苯酚，避免接触皮肤或吸入。为防止溅入眼睛，请戴防护眼镜或使用透明保护屏。如皮肤接触 Beyozol，请立即用大量去垢剂和水冲洗，如仍有不适，请听取医生意见。 Ø Beyozol抽提总RNA的同时，理论上也可抽提蛋白和DNA，但尚未经测试。有兴趣者可按Trizol的操作步骤进行操作。 Ø 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。使用说明： 1. 细胞裂解或组织匀浆。 a. 贴壁细胞吸尽培养液，每 10平方厘米细胞加入1ml Beyozol。一般六孔板每孔加1ml，12孔板每孔加 0.5ml。晃动3-5下，再用枪吹打 2-3下，确保全部裂解，然后吸至离心管中。 b. 悬浮细胞离心收集细胞，吸尽液体，每五百万至一千万动植物或酵母细胞，或一千万细菌，加入1mlBeyozol。用枪吹打或适当vortex 确保全部裂解。某些酵母和细菌如裂解不充分，可用匀浆器匀浆，确保全部裂解。 c. 组织先将组织剪切成小块，放入普通玻璃匀浆器内。每50mg-80mg组织加入1ml Beyozol，匀浆。 2. 对于某些蛋白，多糖或脂含量很高的细胞或组织，Beyozol 裂解后可能会有不溶物或油脂状漂浮物。需12,000g 4℃ 离心10 分钟，然后吸取澄清的Beyozol裂解产物至一新的离心管中。 3. 室温放置5分钟，使样品充分裂解。 4. 每毫升Beyozol加入0.2ml氯仿，vortex混匀或猛烈晃动15秒，室温放置2-3分钟。 5. 12,000g 4℃离心15分钟，然后吸取含总RNA的上层水相至一新的离心管中，每毫升Beyozol约可吸取0.5-0.55ml。 6. 按每毫升最初的Beyozol加入0.5ml异丙醇，颠倒数次混匀，室温沉淀10分钟。 7. 12,000g 4℃离心10分钟，在管底可见胶状RNA沉淀，弃上清。 8. 每毫升最初的Beyozol加入1ml75%乙醇，vortex或颠倒混匀， 9. 7,500g 4℃离心5分钟，弃上清。再用离心机甩一下（>5,000rpm, 离心1秒），小心吸尽液体。 10. 待RNA略干后，加入20微升DEPC水溶解，-70℃冻存。注意，RNA过分干燥，否则将极难溶解，且测出的A260/280值会切勿让低于1.6。
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