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一步实现单拷贝到高拷贝的转换---CopyControl克隆技术 |
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单拷贝克隆产量低,高拷贝克隆稳定性差,一直让研究者在克隆表达时难以选择。蛋白的表达就有诱导表达系统,可以实现人为地控制蛋白的表达时间和表达量——现在连质粒的拷贝数可以借助诱导的方法来人为控制了!Epicentre的专利技术——CopyControl克隆系统能够让您共享单拷贝和高拷贝的优点。CopyControl克隆首先以单拷贝形式生长——单拷贝可以确保插入稳定及成功克隆编码毒性基因序列——在需要的时候,再诱导成高拷贝克隆,以便下游应用所需。这一系统可以用来构建PCR克隆,对于BAC,fosmid文库等大型质粒格外有用。CopyControl克隆系统有两个重要的成分:1.CopyControl pCC1 Vector. 这个载体含有两个复制起始位点(如图1):单拷贝的大肠杆菌F-因子复制子,和诱导型的高拷贝oriV。 OriV的启动,需要trfA基因产物,trfA基因既不在pCC1 Vector上,也不在其他常规用来克隆的大肠杆菌菌株中,这个基因由CopyControl 的第二个重要元件—— TransforMax EPI300 E.coli菌株提供。2.TransforMax  < 1 > < 2 >
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