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    使用一步法RT-PCR从单一细胞中检测基因

    方法: 分离单一细胞 在去除了细胞培养基后,COS-7细胞用不含钙镁的DPBS(0.20g/L KCl, 0.20g/L KH2PO4, 8.00g/L NaCl, 2.16g/L Na2HPO4·7H2O)清洗一次。加入Trypsin-EDTA(0.25% tryspsin,1mM EDTA·4Na)到细胞中(3ml/75cm2培养瓶)并保温至最多5分钟。加入20ml生长培养基以终止胰蛋白酶的活性。离心收集细胞。将细胞悬浮到DPBS中至大约1000个细胞/ml。取10μl悬浮液(大约10个细胞)点到清洁的盖玻片表面。用微量移液管在相差显微镜(Nikon Diaphot倒置显微镜,200倍放大)下收集细胞。分离的细胞(在少于1μl的DPBS中)转移到0.2ml薄壁PCR管中。
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