相关文章  
  • 膜分离技术在生物发酵工业中的应用
  • 血培养检测规范化操作
  • RNA抽提指南(TRIZOL)
  • 使用一步法RT-PCR从单一细胞中检测基因
  • PCR/RT-PCR指南---测定PLATINUMTM pfx DNA聚合酶的保真度
  • PCR/RT-PCR指南---相关产品(13)
  • EB的使用常识
  • 分子生物学葵花宝典
  • 双重感染雪上加霜:超级感染者使艾滋病研究步履维艰
  • mRNA差别显示技术
  •   推荐  
      科普之友首页   专利     科普      动物      植物    天文   考古   前沿科技
     您现在的位置在:  首页>>动物 >>生命科学

    PCR/RT-PCR指南---疑难解答(12)

    问 题 可能原因 建议解决方法 RT-PCR灵敏度:在琼脂糖凝胶分析中看到少量或没有RT-PCR产物 RNA被降解 在用来验证完整性之前先在变性胶上分析RNA使用良好的无污染技术分离RNA在将组织从动物体取出后立刻处理在100%甲酰胺中储存RNA如果使用胎盘RNase抑制剂,不要加热超过45℃或pH超过8.0,否则抑制剂或释放所有结合的RNase。而且,在≥0.8mM DTT时加入RNase抑制剂,一定要存在DTT。 RNA中包含逆转录抑制剂 通过乙醇沉淀RNA除去抑制剂。用70%(v/v)乙醇对RNA沉淀进行清洗。可以加入糖元(0.25μg到0.4μg/μl)以帮助小量样品RNA的恢复。逆转录抑制剂包括:SDS,EDTA,甘油,焦磷酸钠,亚精胺,甲酰胺和胍盐。将对照RNA同样品混合,同对照RNA反应比较产量以检验抑制剂。 多糖同RNA共沉淀 使用氯化锂沉淀RNA以除去多糖。
    < 1 >   < 2

         

          设为首页       |       加入收藏       |       广告服务       |       友情链接       |       版权申明      

    Copyriht 2007 - 2008 ©  科普之友 All right reserved