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1)用离子交换分离蛋白质或多糖以往多用弱的离子交换树脂,现在出现了许多强离子交换树脂,如Q Sepharose Fast Flow、SP Sepharose Fast Flow,资料上介绍这些埴料性能较好。请问楼主,是否我买了Q Sepharose Fast Flow一般就不用买DEAE Sepharose等弱阴离子填料?谢谢。 我觉得Q可以部分代替DEAE. 2)求助,我有一段小分子量的蛋白,5KD左右,4对二硫键,诱导表达后以包涵体形式存在,请问,我怎么设计我的纯化步骤?我用过离子交换柱,纯度可以达到60%,但是不知道下边该怎么做?望赐教!这是我的电泳图谱,第8条泳带的最下边就是我的目的蛋白带,我需要复性,这是一段杀菌蛋白,我要复性之后做抑菌圈。我用的pET-3C的载体,BL21表达 你好,我做复性不多,你可以依据有关有多对4对二硫键的蛋白复性的原理看这方面的文献,我看一般有不少用谷胱甘肽氧化型和还原型配比做的,还有用分子伴侣,你可以多看看再尝试. 至于纯化,如果你的蛋白有游离的巯基,那我觉得很时候用以前的共价层析,专门对于巯基进行纯化,那填料叫71-7105-00 Thiopropyl Sepharose 6B不知道现在还有没有这个填料,你可以问pHarmacia公司的人。你pM给我,我可以把这个材料发给你,如果没有,那你只好 < 1 > < 2 >
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