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    蛋白质纯化经验指南(2)

    1)问一个有关DEAE Sephadex A 50的问题,我的填料处理好后别人拿去用了,用了一次,结果我把他放到烧杯后,发觉已成絮状,不知有没有坏掉?可以再用吗?用什么方法可以把它恢复到原状?这个絮状的东西有颜色吗,会不会是染菌了,或者是脏的东西没有处理干净,你可以用0.5MNaoH泡半小时,沉淀后倾去上清,做三次这样的处理,如果还有不干净的东西,你可以用6M盐酸胍泡半个小时,然后处理和NaoH一样,再换水,这样你看能不能洗回来,如果不能很好沉淀下来,那就不能用了。凝胶类的填料很容易长菌,用完得洗干净,保存在20%的乙醇中。 2) 首先我想问一下agarose和sepharose区别,我的理解是:都指琼脂糖,但agarose是未连接其他介质的,而sepharose是连接其他介质的,不知理解对不对?请指教!Glutathione-agarose(4%cross-linked beaded agarose)和Glutathione Sepharose 4B是一种东西吗?其次,我想问一下你纯化过GST融合蛋白没有?我现纯化一个融合蛋白(某种酶和GST融合),我买了SIGMA公司的GLUTATHIONE-AGAROSE五毫升,但我不知怎么做.分子克隆说直接将亲和介质于细菌裂解液混允离心....我不知我买的可不可以这样做.而产品说明书上说做柱子,我就想1毫升的柱子
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