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述已凝固的平皿用记号笔在平皿底划成八等份,每一等份内标明一种药物的名称。 (4)用无菌镊子将小圆形滤纸片分别浸入各种药品中,取出,并在试管内壁上除去多余药液后,以无菌操作将纸片对号放入培养皿的小区内,如图Ⅸ-1。 (5)将上述放好滤纸片的含菌平皿,倒置于37℃温室中培养24小时后,取出测定抑菌圈大小,并说明其杀菌强弱。 2.石炭酸系数的测定 (1)将5%(1:20)的石炭酸液按表Ⅸ-1配成不同浓度,每管5ml。 (2)将待测药物(来苏尔)先配成1:20的原液,再按表Ⅸ-2配成不同浓度,每管 5ml。 (3)取肉膏蛋白胨液体培养基30管,1—15管标明石炭酸的5种浓度,每种浓度3管,每3管分5、10、15分钟处理,16—30管标明来苏尔的5种浓度,同样每种浓度3管,每3管分5、10、15分钟处理。 (4)在上述不同浓度的石炭酸和来苏尔溶液中,各接入0.5ml大肠杆菌液,摇匀。注意每管自接种时起在5、10、15分钟,用同一接种环从各管内取一环接入上述已标记的液体培养基试管中。 (5)置37℃温室中培养 48小时,观察并记录生长情况。生长者溶液混浊,以“+”表示;不生长者溶液澄清,以“-”表示。 (6)计算系数值 找出在5分钟生长,而在10分钟和15分钟均不生长的石炭酸及来苏尔的最大稀释度,计算二者的比值。例如石炭酸在10分钟内杀死大肠杆菌的最大稀释度是1:70,来苏尔是1:250,则来苏尔的石炭酸系数为250/70=3.6。 五、实验报告 1、结果 (1)各种化学药品对白色葡萄球菌的致死能力 (2)石炭酸系数的测定和计算 来苏尔对大肠杆菌的石炭酸系数是多少? 2.思考题 化学药剂对微生物所形成的抑菌圈未长菌部分是否说明微生物细胞已被杀死? < 1 > < 2 >
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