微生物实验---厌氧微生物的培养

　　一、目的要求　　学习几种厌氧微生物的培养方法。　　二、基本原理　　厌氧微生物在自然界分布广泛，种类繁多，作用也日益引起重视。培养厌氧微生物的技术关键是要使该类微生物处于除去了氧或氧化还原势低的环境中。　　焦性没食子酸与碱性溶液作用后，形成碱性没食子酸盐，在此反应过程中能吸收氧气而造成厌氧环境；牛肉渣内既含有不饱和脂肪酸能吸收氧，又含有谷胱甘肽（glutathione）能形成负氧化还原电位差；厌氧罐是采用某种方法除去其中的氧，例如将镁与氧化锌制成产氢气袋，放入罐中加水反应产生氢，钯或铂是催化剂，在常温下催化氢与氧化合成水，则可除去密封的厌氧罐中的氧。　　三、器材　　巴氏芽孢梭菌（巴氏固氮梭状芽孢杆菌，Clostridium pas- teurianum），荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）；　　焦性没食子酸，棉花，10%NaOH，灭菌的石蜡凡士林（1∶1），牛肉，蛋白陈，葡萄糖， NaCl，肉膏蛋白胨琼脂培养基，小试管肉膏蛋白胨琼脂斜面，厌氧罐，催化剂袋，气体发生袋，指示剂袋，灭菌的带橡皮塞或螺旋帽的大试管，灭菌的玻璃板（直径比培养皿大3—4 cm），灭菌的滴管，烧瓶，刀等。　　四、操作步骤　　1．焦性没食子酸法　　（1）大管套小管法在大试管中放入少许棉花和焦性没食子酸，焦性没食子酸的用量按它在过量碱液中能每克吸收100ml空气中的
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