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一、目的要求 了解大肠杆菌生长曲线的基本特征,从而认识微生物在一定条件下生长、繁殖的规律。 二、基本原理 一定量的微生物,接种在适合的新鲜液体培养基中,在适宜的温度下培养,以菌数的对数作纵坐标,生长时间作横坐标,做出的曲线叫生长曲线。一般可分为延迟期、对数期、稳定期和衰亡期四个时期。不同的微生物有不同的生长曲线,同一种微生物在不同的培养条件下,其生长曲线也不一样。因此,测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。 测定微生物生长曲线的方法很多,有血球计数法、平板菌落计数法、称重法、比浊法等。本实验采用比浊法测定,由于细菌悬液的浓度与混浊度成正比,因此,可利用光电比色计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度,并将所测得的光密度值(OD值)与其对应的培养时间作图,即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。现已有直接用试管就可以测定OD值的光电比色计(图Ⅶ-10),只要接种一支试管,定期用它测定,便可做出该菌的生长曲线。 三、器材 培养18—20小时的大肠杆菌培养液,盛有5ml肉膏蛋白胨液体培养基的大试管12支; 72型或72.1型分光光度计,自控水浴振荡器或摇床,无菌吸管等。 四、操作步骤 1.编号 取11支盛有肉膏蛋白胨液体培养基的大试管,用记号笔标明培养时间,即0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16、20小时。 2 < 1 > < 2 >
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