微生物实验---细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的菌落观察和细菌菌落

即摇荡使血液和琼脂培养基充分混匀。　　(4)迅速以无菌操作倒入平板，使成血液琼脂平板，注意不要产生气泡。　　(5)置37℃过夜，如无菌生长即可使用。　　(6)将无菌的平板取出进行划线接种分离单个菌落，因要保持琼脂表面完整，接种改用圆头光滑玻棒，注意不要把琼脂划破。接种后，倒置于37℃温室中培养，次日观察结果。如有单独菌落出现，即可进行下项实验。　　3．细菌菌落制片　　(1)细菌菌落印取选择一个较小的单独菌落，用小刀将菌落周围约10—15mm的正方琼脂切下，将此琼脂块上长有菌落的一面朝下，轻放在盖玻片上，然后连同琼脂块将盖玻片小心放于Bouin氏固定液中约1小时，直至琼脂完全变为白色后取出，将琼脂小心剥去，剥时注意勿损伤菌落，仅使菌落留下，附着在盖玻片上。　　(2)用细水流轻轻冲洗附有菌落的盖玻片。　　(3)用0．01％结晶紫染液染色3分钟后水洗，吸干。　　(4)脱水将盖玻片置于由低浓度到高浓度的酒精中（35％、50％、60％、70％、80％、95％、100％）各5分钟，但在100％酒精中浸15分钟。　　(5)透明取出经过脱水的盖玻片，再放入二甲苯中2分钟。　　(6)封固从二甲苯中取出盖玻片，用软纸拭去菌落周围的二甲苯。随即加一小滴加拿大乳胶于一洁净载玻片的中央，迅速反转盖玻片，轻轻地放在载玻片上，使加拿大乳胶铺满盖玻片，注意不要产生气泡，如果有气泡即轻轻压出。用低倍显微镜观察其菌落特征。待乳胶完全干燥，一二天后装木匣内保存。五、实验报告　　1．结果　　将观察到的微生物菌落特征填入下表中。　　　　2．思考题　　(1)试比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落形态的差异？ (2)在用酒精脱水时，为什么要从35％的浓度开始，而不直接放于100％的酒精中？
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