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一、目的要求 1.学习并掌握细菌鞭毛染色的基本方法及观察细菌鞭毛的着生情况。 2.学习用压滴法和悬滴法观察细菌的运动性。 二、基本原理 鞭毛是细菌的运动“器官”,一般细菌的鞭毛都非常纤细,其直径为0.01—0.02μm,在普通光学显微镜的分辨力限度以外,故需要用特殊的鞭毛染色法,才能看到。鞭毛染色是借媒染剂和染色剂的沉淀作用,使染料堆积在鞭毛上,以加粗鞭毛的直径,同时使鞭毛着色,在普通光学显微镜下能够看到。 在显微镜下观察细菌的运动性,也可以初步判断细菌是否有鞭毛。通常使用压滴法或悬滴法观察细菌的运动性。观察时,要适当减弱光线,增加反差,如果光线很强,细菌和周围的液体就难以辨别。 三、器材 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis),假单胞菌(Pseudomonas sp.),金*葡萄球菌; 鞭毛染色液,万分之一的美蓝水溶液,凡士林,无菌水,载玻片,凹玻片,盖玻片等。 四、操作步骤 1.鞭毛染色 (1)菌种用新培养的菌种为宜,如所用菌种已长期未移种,则用新制备的斜面连续移种2—3次后再使用。最好是将经活化的菌种接种到新制备的琼脂斜面或半固体培养基平皿上,培养10小时左右,备用。 (2)制片 在载玻片的一端滴一滴蒸馏水,用接种环挑取少许备用的菌苔,最好从菌落的边缘取菌苔,注 < 1 > < 2 >
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