微生物实验---细菌的单染色法

　　一、目的要求　　1．学习微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌的单染色方法及无菌操作技术。　　2．巩固显微镜的使用方法。　　二、基本原理　　所谓单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。此法操作简便，适用于菌体一般形态的观察。　　在中性、碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，所以常用碱性染料进行染色。碱性染料并不是碱，和其他染料一样是一种盐，电离时染料离子带正电，易与带负电荷的细菌结合而使细菌着色。例如，美蓝（亚甲蓝）实际上是氯化亚甲蓝盐（methylenebluechloride，缩写为MBC），它可被电离成正、负离子：MBC→methylene blue++chloride-　　带正电荷的染料离子可使细菌细胞染成蓝色。常用的碱性染料除美蓝外，还有结晶紫（crystal violet）、碱性复红（basicfu-chsin）、番红（又称沙黄，safranine）等。　　细菌体积小，较透明，如未经染色常不易识别，而经着色后，与背景形成鲜明的对比，使易于在显微镜下进行观察。　　三、器材　　显微镜，酒精灯，载玻片，接种环，双层瓶，擦镜纸，生理盐水；　　吕氏碱性美蓝染色液，石炭酸复红染色液；　　金*葡萄球菌，枯草芽孢杆菌。　　四、操作步骤　　1．涂片取两块干净的载玻片，各滴一小滴生理盐水于载玻片中央，用无菌操作（图Ⅳ-1，具体操作参照实验一），分别挑取金
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