微生物实验---相差显微镜

一、目的要求　1．了解相差显微镜的基本原理和用途。　2．学习掌握相差显微镜的操作技术。二、基本原理　　暗视野显微镜可以看到活细胞的外部形态，但是看不清内部结构。相差显微镜不仅能观察活细胞的形态，而且还能看到细胞内部结构以及细胞分裂的连续过程。　　光线通过透明物体如活细菌细胞后，由于受透明物体中密度和折射率不同的物质的影响，部分光线变成了绕射光，光波的相位发生变化，而这种相位差不表现为明暗和颜色上的差异，不能在显微镜视野中观察到。相差显微镜就是将经过透明物体的直射光延迟或提前，并和绕射光产生干涉，使相位差变为振幅差。如果产生的干涉为相长干涉（图Ⅲ-8，R组光线），则振幅的同相量相加而变大，我们便看到较亮的部分；如果所产生的干涉为相消干涉时（如图Ⅲ-8，S组光线），则振幅异相量相消而变小，这部分就变得较暗。这样，变相位差为振幅差的结果，使原来透明的物体表现出明显的明暗差异，对比度增加，能更清晰地观察活细胞的细微结构。　　相差显微镜成像原理和装置如图Ⅲ-9所示。　　在普通光学显微镜上增加下列四种附件就成为相差显微镜：　（1）环状光阑　　相差显微镜的聚光镜光阑是环状光阑。照明光线只能从环状的透明区进入聚光镜再斜射到标本上（斜射角度远小于暗视野聚光镜）。大小不同的环状光阑成一转盘（图Ⅲ-10，A），安装于聚光镜下面，更换放大率不同的物镜时，要同时更换与其相应的光阑。　（2）相差物镜（
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