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0.1×SSC,37℃各漂洗10～30min。 （14）0.05mol/l PBS 冲洗4×5min。 （15）3%BSA（0.4%Triton X-100 PBS配）37℃保温30min。 （16）Avidin –AKP(碱性磷酸酶)（1：500～1：100，0.4%Triton X-100 PBS配）室温1～3h。 （17）0.05mol/l PBS冲洗4×5min。 （18）TSM1冲洗2×5min。 （19）TSM2冲洗2×5min。 （20）硝基四氮唑蓝（NBT）0.4%mg/ml 和5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸（BCIP）0.2mg/ml混合液显色，室温，暗处3h。 （21）20mmol/l EDTA,pH8.0终止显色。 （22）甘油明胶直接封片。
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