mmol/L NaCl; 5mmol/L EDTA （pH8.0）; 0.5% SDS。 操作步骤: (1) 200ng双链DNA(1μl)和7.5ng随机引物(1μl)混合后置于eppendorf管内,水浴煮沸5分钟后，立即置于冰浴中1分钟。 (2) 与此同时,尽快在一置于冰浴中的0.5ml eppendorf管内混合下列化合物: 20mmol/L DTT 1μl 未标记的dNTP溶液 1μl 10×随机标记缓冲液 1μl [α-32 P] dATP(比活性>3000Ci/mmol; 10μCi/μl) 3μl ddH2O 1μl (3) 将步骤(1)eppendorf管中的溶液移到步骤(2)管中。 (4) 加入5单位(约1μl) Klenow片段, 充分混合,在微型离心机中以12000g离心1-2秒, 使所有溶液沉于试管底部,在室温下保温3-16小时。 (5) 在反应液中加入10μl缓冲液A后,将放射性标记的探针保存在-20℃下备用。同时计算放射比活性。
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