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    鸟枪法(Shotgun)的基本步骤

    针,通过分子杂交的手段找出带有目的基因的DN-段的实验方法。用菌落(菌斑)原位杂交或免疫原位检测法可快速筛选基因文库。一般采用三步甚至两步筛选法,可以在短时间内完成全基因文库的筛选,其程序为:首先制备高密度平板,使每块平板密集分布5000-10000个菌落或噬菌班,进行原位杂交;由感光胶片上的斑点位置在原杂交阳性平板的相应区域挖下固体琼脂,用新鲜培养基洗涤稀释;将稀释液再次涂布平板,使每块平板只含有200-500个可辨认的菌落或菌斑;用相同的探针进行二轮杂交,直至准确挑出期望的重组克隆。
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