质粒DNA的纯化

（一）聚乙二醇沉淀法质粒ＤＮＡ这里介绍的方法（R.Tresman,个人通讯）已卓有成效地用于纯化碱裂解法制备的质粒ＤＮＡ。１）将核酸溶液[上页步骤９）所得]转入15mlＣorex 管中，再加3ml 用冰预冷的5mol/L LiCl溶液，充分混匀，用Ｓorvall SS34 转头（或与其相当的转头）于４℃下以10 000转/分离心10分钟。LiCl可沉淀高分子ＲＮＡ。２）将上清转移到另一30mlCorex管内，加等量的异丙醇，充分混匀，用SorvallSS34转头（或与其相当的转尖）于室温以10 000转/分离心10分钏，回收沉淀的核酸。３）小心去掉上清，敞开管口，将管倒置以使最后残留的液滴流尽。于室温用70％乙醇洗涤沉淀及管壁，流尽乙醇，用与真空装置相连的巴其德吸管吸去附于管壁的所有液滴，敞开管口并将管侄置，在纸巾上放置几分钟，以使最后残余的痕量乙醇蒸发殆尽。４）用500μl含无ＤＮＡ酶的胰ＲＮＡ酶(20μg/ml ）的ＴＥ（pH8.0）溶解沉淀，将溶液转到一微量离心管中，于室温放置30分钟。５）加500μl含13％（w/v)聚乙二醇（PEG 8000）的1.6mol/L NaCl,充分混合，用微量离心机于４℃以12000g离心５分钟，以回收质粒ＤＮＡ。６）吸出上清，用400μl TE(pH8.0)溶解质粒ＤＮＡ沉淀。用酚、酚：氯仿、氯仿各抽１
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