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(一)原理 等电聚焦技术是一种根据样品的等电点不同而使它们在pH梯度中相互分离的一种电泳技术。 本法的分辩率极高,所以在进行等电聚焦电泳时,要求样品不能过于复杂,一般应经其他方法(如层析法)提纯后再进行等点聚焦,才能得到比较满意的结果。如利用人的纯IgG再经过等电聚焦电泳,可以满意地分离IgG的四个亚类。如IgG2浓缩于pH7.0的部位,IgG3浓缩于pH8.0~9.0的范围内,IgG4则浓缩于pH6.0以下的部位,而IgG则分布于全部pH范围,且只有IgG1能存在于pH9.0以上的部位。 等电聚焦电泳与其他分离方法结合起来,将是一项很有前途的分析鉴定和制备样品的好技术。(二)器材与试剂配制1.聚焦柱 有成品出售,分110ml和440ml两种。2.电源 0V~1 200V可调20W的直流稳压电源。3.载体两极电解质 市售25ml瓶装,浓度为40%或20%(W/V),pH范围为2.5~11,也有其它pH范围的,可根据实验条件选择购买。 4.蔗糖(分析纯)1. 电极液的配制见表: 表 正电极缓冲液的配制 < 1 > < 2 >
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