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    离子交换柱层析分离核苷酸

    一、实验目的    本实验以酵母RNA为材料,将RNA用碱水解成单核苷酸,再用离子交换柱层析进行分离,最后采用紫外吸收法进行鉴定。同时通过测定各单核苷酸的含量,可以计算出酵母RNA的碱基组成。    本实验的目的是:    1. 了解掌握RNA碱水解的原理和方法    2. 掌握离子交换柱层析的分离原理和方法    3. 熟练掌握紫外吸收分析方法二、实验原理   1. RNA的碱水解     实验室制备单核苷酸一般用化学水解法(酸、碱水解)和酶解法。RNA用酸水解可得到嘧啶核苷酸和嘌呤碱基;用碱水解可得到2’一核苷酸和3’一核苷酸的混合物;用5’一磷酸二酯酶或3’一磷酸二酯酶水解则分别可得到5’一核苷酸或3’一核苷酸。     RNA用碱水解,经过2’、3’一环核苷酸中间物,而后水解生成2’一核苷酸和3&
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