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    功能基因组学研究新方法——双色红外荧光检测技术

       基因组序列的迅速获得推动了一门新兴学科——功能基因组学的发展,这一学科重点关注基因功能的变化。扩增性片段长度多态性(Amplified restriction fragment length polymorphism,AFLP)分析以及反向遗传学都是功能基因组学的重要组成部分。  传统的反向遗传学,例如用转座子(transposon)敲除特定基因,虽然可以准确测定表型,但需要进行耗时的转基因或复杂的组织培养。而且由于这种基因敲除的方法将整个基因敲除,无法观察到活性基因功能部分缺失的结果。  为克服此基因敲除方法的局限性,进一步获得关于活性基因突变的信息,Fred Hutchinson癌症研究中心的研究者们发明了一种定向诱导基因组局部突变(TILLING: Targeting Induced Local Lesions In Genomes)技术。该方法具有简单高效的特点,它利用化学突变方法来获得所有基因的传统的点突变等位基因系列。对那些表型分析时会牵涉到亚致死等位基因的重要基因,TILLING的方法具有其独特的优势。随着TILLING方法有效应用到越来越多的生物种类,如果蝇,拟南芥,斑马鱼,玉米等,它在遗传学研究方面的重要价值也越发体现出来。  但由于点突变一般很难被检测出来,一直是TILLING技术应用上的一个障碍。要得到
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