重组质粒的提取

质粒提取过程参照E.Z.N.A Plasmid Extraction Kit进行。（1）用无菌牙签挑取平板上白色单菌落(5~10个)分别接种至3-5ml LB培养液(Amp+)中,200rpm培养14~16小时；（2）室温下，10,000g离心1分钟收菌；（3）加入溶液I 250μl，涡旋重悬菌体；（4）加入溶液II 250μl，温和倒转4~6次混匀，室温放置2分钟（5）加入350μl溶液III，温和倒转至有白色絮状沉淀产生，室温下，10,000g离心10分钟；（6）转移上清液于分离柱中，室温下，10,000g离心1分钟；（7）倒弃流出液，加入500μl HB Buffer，室温下，10,000g离心1分钟（8）倒弃流出液，加入750μl Wash Buffer，室温下，10,000g离心1分钟，倒弃流出液，重复此步骤一次；（9）室温下，10,000g离心1分钟，以去除分离柱中残余的乙醇（10）将分离柱重新放入一
< 1 > < 2 >

设为首页 | 加入收藏 | 广告服务 | 友情链接 | 版权申明