MinElute DNA纯化技术

样，不用酚抽不用乙醇沉淀，就可以进行第二次酶切，保证最佳反应条件，又何必煞费苦心的作双酶切呢，还可以减少一些人为的错误了。 MinElute DNA纯化技术是基于一种特殊的、叫做Silica-gel-menbrane的膜，能够在高盐浓度的条件下迅速吸附DNA，在低盐或者纯水条件下释放DNA，只要短短几分钟，就能彻底除去包括引物、核苷酸、酶、矿物油、盐、琼脂糖、EB以及其它杂质，和以前QIAGEN的Silica-gel-menbrane有所不同的是，它要求的洗脱体积非常小，只要10微升，纯化的DNA是高度浓缩的，方便进行以后的反应。回收率在80%以上。反应步骤非常简单，只要将Binding Buffer加入酶切样、PCR产物或者切下来的凝胶条中充分混匀，加入柱中离心，洗涤，用10微升ddH2O或Elution Buffer洗脱即可。纯化的产物可用于连接、标记、测序、杂交、酶切、显微注射、体外转录等后继实验。由于洗脱体积小，无需进一步浓缩也能保证很高的回收率。比如双酶切，可以在第一次酶切后将酶切样直接纯化，留下1、2微升电泳检测，剩下的7、8微升样品全部进行下一个酶切，非常方便，不会浪费样品。不过它的吸附范围是70bp到4kb，而不是以往的10kb。4kb以上的只能用以前的Qiaquick系列了，而10kb以上就该用QIAEX II系列。和以往一样，MinElute系列也分为PCR回收试剂盒、胶回收试剂盒、反应产物回收试剂盒可供选择。记得一位回国访问的老师曾经说起，以前觉得美国学生笨，只会照着试剂盒123的作实验，没了说明书就不知如何是好，而中国学生聪明，能够灵活运用，可是如今发现中国学生有时太过灵活，省略不作对照、自作聪明地简化实验步骤，最后出了问题也找不到原因，反而不好。当时我们就说，没办法，都是没钱惹的祸，舍不得买试剂盒——能省就尽量将就一下，就是买了还要想办法节约一个对照，有时候就这么养成这种小家子气的习惯。回过头来想，真是：所谓“Research”就是要反反复复的“search”，不断失败，不断“search”，如果一下子就成功就不叫“Research”了，没有严谨良好的实验习惯就很难找到失败的原因，就很难做好Research。
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