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DNA芯片是利用核酸杂交原理检测未知分子的,将核酸或核酸片段按照一定顺序排列在固相支持物上组成密集的分子阵列。按照其结构基本上可分为两种类型: I型,将待测 DNA分子样品固定在固相支持物上并与一系列游离的标记探针杂交,杂交探针或是单一的或是混合的;II型,按照预先设定顺序将寡核苷酸固定于固相支持物上再与标记的DNA样品进行杂交,由已知的寡核苷酸序列确定被检测的DNA样品。通过检测标记信号的分布谱型(Pattern)得到分子杂交情况,并由计算机分析处理。DNA芯片一般只有1-2平方厘米,在这样大小的空间内需要排列几百甚至上百万个单元。因而DNA芯片制作是一个复杂而精密的过程,主要有以下两种方法。 第一种方法是光导原位合成法。示意图见图一。具体方法是在经过处理的载玻片表面铺上一层连接分子(linker),其羟基上加有光敏保护基团,可用光照除去,用特制的光刻掩膜(photolithographic mask)保护不需要合成的部位,而暴露合成部位,在光作用下去除羟基上的保护基团,游离羟基,利用化学反应加上第一个核苷酸,所加核苷酸种类及在芯片上的部位预先设定,所引入的核苷酸带有光敏保护基团,以便下一步合成。然后按上述方法在其它位点加上另外三种核苷酸完成第一位核苷酸的合成,因而N个核苷酸长 < 1 > < 2 >
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