清华大学构建热诱导自溶性载体<%=id%>

进化（directed. evolution）高通量分析提出了一种新方法。这一研究发表在9月的《BioTechinques》上。..
　　这一研究项目受到国家973项目（生物催化剂改造方法学的基础与应用研究，2003CB716002），863项目（2003AA214061），以及自然科学基金（20206015）的资助。..
　　在分子定向进化（directed. evolution）研究中，常常会利用高通量筛选系统（high-throughput. screening. system）分析蛋白（酶）变种(enzyme. variants)，当靶标蛋白（酶）在细胞内表达了之后，比如说将大肠杆菌作为宿主，常常需要用化学物质或者酶对细胞膜进行裂解，而这个过程十分繁琐，费时费钱。..
　　林博士等人在这一论文中报道了一套热诱导自溶性载体（heat-inducible. autolytic. vectors）解决了这一问题：将噬菌体λ中的SRRz裂解基因盒（SRRz. lysis. gene. cassette）放到热诱导启动子（λ. cI857/pR和突变体cI857/pR. (M)）下游，并且将重组的自溶单元插到pUC18里，对于野生型启动子，cI857/pR,. the. SRRz裂解基因盒在38°C会表达，而且对于细菌细胞的裂解效率达到96.3%（报告基因β-galactosidase）。为了获得更高的细胞生长速度，研究人员又分析了突变型启动子cI857/pR. (M)，裂解基因盒可以在42°C裂解，但是效率并不稳定。这些研究对于高通量筛选系统，表达载体的利用，以及外源酶的快速细胞外分析提供了新的思路，值得关注。..

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