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    宫颈癌基因治疗特异性新技术研究成功<%=id%>

    逆转录(hTERT)基因核心启动子调控的人单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/更昔洛韦(HAS-tk/GCV)系统宫颈癌细胞(HeLa)特异性治疗”新技术,该技术对体外HeLa具有明显的杀伤作用。
    ... 据介绍,宫颈癌是一种死亡率较高的恶性肿瘤,传统治疗方法以手术、化疗及放疗为主,但患者生存率仍不理想。随着分子生物学技术的发展,*基因疗法在肿瘤治疗中获得了一定成功。科研人员已经证明,抑制端粒酶的活性能明显抑制肿瘤生长,甚至迫使癌细胞*。hTERT基因在90%的人类肿瘤组织中呈过表达,具有明显的肿瘤特异性。
    ... 为探讨hTERT基因对HeLa特异性治疗的新方法,研究人员采用克隆技术,构建hTERT基因启动子调控的胸苷激酶基因(tk)真核表达载体pCI-neo/hTERT-tk,分别用脂质体法转染HeLa和正常血管内皮细胞(ECV304),并通过克隆扩增后,用RT-PCR法检测tk基因的表达情况,用流式细胞术检测hTERT调控的HSV-tk/GCV系统对宫颈癌细胞及血管内皮细胞的杀伤作用。
    ... 检测结果发现:在重组质粒pCI-neo/hTERT-tk中,出现与tk基因大小相符的约为1100bp的条带;HeLa细胞转染pCI-neo/hTERT-tk质粒后,可测到tk基因阳性表达,而正常的ECV304细胞转染后则无tk细胞表达;HeLa细胞凋亡率为36.7%,ECV304细胞凋亡率为5.2%,两组相比有显著性差异(P<0.01)。同时,HeLa细胞S期所占比例为11.9%,而ECV304细胞S期所占比例高达32.7%(P<0.01)。提示hTERT在恶性肿瘤中阳性表达率高,在正常细胞中低表达或不表达。
    ... 研究人员认为,hTERT基因是决定端粒酶活性的重要组成部分,只有在端粒酶表达阳性的肿瘤细胞中,hTERT基因启动子才发挥作用,使tk基因得到表达;同样,只有在肿瘤细胞中得到表达的tk基因产生的tk酶,才可将更昔洛韦(GCV)转化为细胞毒物,抑制DNA的合成和复制,导致细胞凋亡。同时,hTERT-tk基因在正常细胞中,无论是转染前还是转染后均无法引起明显的细胞凋亡这一结果表明,hTERT-tk/GCV系统仅特异于肿瘤细胞,从而实现了肿瘤基因治疗特异性这一根本目的。.
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