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利用计算机来协助克隆基因,称为“电子”基因克隆(sillcon cloning),是与定位克隆、定位候选克隆策略并列的方法之一,即采用生物信息学的方法延伸EST序列,以获得基因部分乃至全长的cDNA序列。EST数据库的迅速扩张,已经并将继续导致识别与克隆新基因策略发生革命性变化。1 EST序列的获取 利用计算机来协助克隆的第一步是必须获得感兴趣的EST,在dbEST数据库中找出EST的最有途径是寻找同源序列,标准:长度≥100bp,同源性50%以上、85%以下。可通过数个万维网界而使用BLAST检索程度实现,其中最常用的如NCBI(National center for Biotechnology Information)的eneBank、意大利Tigem的ESTmachine(包括EST提取者和EST组装机器)、THC(Tentative human Consensus Sequences)数据库、ESTBlast检索程序——通过英国人类基因组作图项目资源中心(Human genome Mapping Project Resource Center,HGMP—RC)服务器上访问。然后将检出序列组装为重叠群(contig),以此重叠群为被检序列,重复进行BLAST检索与序 < 1 > < 2 >
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